Condes

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hace migrar por capilaridad sobre esta membrana, la que tiene
los anticuerpos antivirales específicos fijados y que eviden-
ciarán la unión del antígeno mediante una banda de color
oscuro. Ambas pruebas requieren mínima infraestructura y
pueden estar disponibles en cualquier centro de salud.
La detección de genoma viral en la actualidad es la técnica
de elección en la mayoría de las infecciones virales que
requieren de diagnóstico virológico certero y rápido. Se
basa en la identificación de secuencias específicas de ADN o
ARN viral y puede ser virtualmente utilizada para cualquier
virus. Más aún, la masificación y perfeccionamiento de estas
técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (TAAN) nos ha
llevado al descubrimiento de nuevos virus desde la detec-
ción de su genoma.
Los análisis pueden ser específicos para un virus o bien
para un grupo de ellos. Entre sus principales ventajas están
el poder detectar virus que no pueden ser aislados en
cultivos celulares, o en aquellas infecciones en las que la
carga antigénica es muy baja como para ser detectada por
inmunoanálisis. Además, debido a la estabilidad del ADN,
la detección de virus con este tipo de genoma es posible
a pesar de que las condiciones de la muestra no sean las
óptimas. La desventaja principal es la posibilidad de conta-
minación y falsos positivos.
La técnica prototipo de las TAAN es la PCR, o reacción en
cadena de la polimerasa, en la que se amplifican segmentos
de ADN utilizando partidores específicos y una ADN polime-
rasa termoestable (Taq polimerasa). Cabe mencionar que en
los casos en que se deba detectar ARN viral, la amplificación
debe estar precedida por un paso de transcripción reversa,
donde el ARN es copiado a un “ADN copia (ADNc)”. Este ADNc
será el templado que se utilizará en el posterior proceso de
amplificación por la polimerasa.
Los productos de amplificación podrán ser visualizados
mediante distintos métodos: electroforesis en el caso de
PCR convencional; mediante sondas fluorescentes que
permiten la detección en la medida que ocurre la amplifi-
cación (PCR en tiempo real), o mediante la hibridación en
plataformas que permiten la detección de múltiples virus a la
vez (Ej: Pneumovir®, Filmarray ®). Para mayor detalle acerca
de estas técnicas de biología molecular referirse al artículo de
“Biología molecular aplicada al diagnóstico clínico”.
Además de su importante rol en el diagnóstico virológico,
la amplificación del genoma viral ha permitido caracte-
rizar las secuencias nucleotídicas de los agentes detec-
tados mediante técnicas de secuenciación nucleotídica que
se han perfeccionado enormemente en el último tiempo.
Esta valiosa herramienta nos entrega información que
permite clasificar a los virus (genotipificación), conocer su
distribución y transmisión en las poblaciones, y detectar
mutaciones asociadas a resistencia a drogas antivirales o a
manifestaciones clínicas inusuales. Es uno de los pilares de
diagnóstico, estudio y caracterización viral durante brotes
epidémicos como los ocurridos con influenza pandémica el
2009, MERS 2012 y ébola 2014. Las autoridades de salud
se basan en estas técnicas para rastrear virus emergentes.
Por otro lado, la caracterización genética nos acerca a los
cambios que pueden ocurrir en las proteínas virales que
influyen en la patogénesis y nos orienta hacia los meca-
nismos que tienen los virus para escapar de la respuesta
inmune del hospedero (presión inmunológica), siendo
ampliamente utilizada en investigación. Las técnicas de
secuenciación han avanzado enormemente en los últimos
años, siendo la “secuenciación de nueva generación (NGS)”
una promesa para avanzar en el conocimiento de la pato-
genia viral y para descubrir y rastrear nuevos o descono-
cidos virus.
Por último, a pesar que actualmente no representa uno de
los pilares del diagnóstico virológico, la detección y caracte-
rización de la respuesta inmune antiviral continúa siendo
necesaria para determinar infección aguda en algunas
infecciones virales, para caracterizar la susceptibilidad de
los individuos a potenciales infecciones (pre-trasplante,
pacientes oncológicos), en la vigilancia de la seroconver-
sión en individuos vacunados y en población general y en
la caracterización de los perfiles de respuesta a infecciones
crónicas como en la infección por virus hepatitis B. Las
técnicas de inmunoanálisis utilizadas en estos casos son de
tipo indirecto, dado que se marcará la unión antígeno-an-
ticuerpo específico (el que está presente o no en el suero
del paciente) mediante la unión de un segundo anticuerpo
que evidenciará la formación del complejo. Los ensayos más
utilizados son inmunofluorescencia, ELISA y Western blot.
Laboratorio virológico según tipos de
infecciones frecuentes en la práctica clínica
En la mayoría de los casos en los que se sospecha una infec-
ción viral, el diagnóstico etiológico se hará basándose en
una completa historia clínica y un detallado examen físico.
Cuadros como el resfrío común, gripe, bronquiolitis, vari-
cela, herpes zoster, diarrea viral entre otros, serán gene-
ralmente diagnosticados al reconocer los síntomas y signos
característicos. A continuación se entrega una tabla resumen
donde se detallan las técnicas de laboratorio, las muestras a
solicitar y algunas características de los exámenes de diag-
nóstico viral sugeridos ante tipos de infecciones frecuentes
en la práctica clínica (Tabla 2).
[REV. MED. CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 744-752]