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Automatización del analítico: Identificación y
estudios de susceptibilidad a antimicrobianos
El ideal actual consiste en la “automatización total” del labo-
ratorio de microbiología, lo que comprende equipos en línea
para siembra, incubación, análisis remoto de colonias desarro-
lladas mediante digitalización de imágenes y posterior identi-
ficación mediante espectometría de masas (MALDI-TOF;
Matrix
Assisted Laser Desorption Ionization -Time of Flight
) con realiza-
ción de antibiograma automatizado a las colonias así identifi-
cadas. Todos estos equipos en línea, estarían interconectados
mediante un software que además comunica con equipos de
hemocultivo automatizado, tinción de Gram y la realización de
técnicas serológicas.
Si bien el ideal de automatización involucra el proceso
completo del laboratorio de microbiología, la automatización
total es un concepto aún lejano en la realidad de la mayor
parte de los laboratorios. Lo que sí es posible en la actualidad,
es contar con metodologías de identificación más rápida que
la convencional.
Identificación
Los procedimientos convencionales de identificación de
microorganismos consisten en observación de características
físicas y tintoriales (morfología de colonias, tinción de Gram) y
de reacciones bioquímicas. Inicialmente, estas pruebas bioquí-
micas se realizaban en medios en tubos, los que con el tiempo
se miniaturizaron en formatos que permitieron aumentar el
número de pruebas y eventualmente automatizar la lectura
de estos resultados. Dependiendo de las reacciones de cada
microorganismo frente a diferentes sustratos, se obtiene un
perfil bioquímico, que al ser comparados con perfiles cono-
cidos, permite la identificación (5, 8, 9).
El tiempo de la identificación convencional era de 24-48 hrs
para permitir la expresión de la reacción, ya que debía lograrse
un número crítico de bacterias, que dependen de su velocidad
de replicación. Con la automatización se logró reducir este
tiempo a 8-10 horas, ya sea porque se detecta reacción con
sustratos preformados, o se logra visualizar la reacción bioquí-
mica con un menor número de replicaciones, dada la minia-
turización de la reacción. Esta reducción en los tiempos exige
la necesidad a contar con personal capacitado durante las 24
hrs en el laboratorio, para optimizar y hacer más eficientes los
procesos, aprovechando así las ventajas que ofrece esta tecno-
logía más rápida. En Tabla 2 se presentan los diferentes tipos
de equipos y kits disponibles para identificación bioquímica
(11).
Durante los últimos años, cada vez más laboratorios están
implementando la tecnología de espectometría de masas
MALDI-TOF, que mediante el análisis proteómico de cepas
bacterianas y fúngicas, permite su identificación en minutos.
La Figura 1 muestra un esquema de esta tecnología y sus
principales etapas. Existen diversos equipos disponibles en el
mercado, siendo los más representativos: MALDI-Biotyper de
Bruker y Vitek MS, de BioMerieux, ambos presentan fortalezas
y debilidades.
En nuestro centro, realizamos una verificación de la tecno-
logía MALDI-TOF, con el objetivo de conocer la concordancia
en identificación de género y de especie, entre metodo-
logía convencional y espectometría de masas, comparando
Tabla 2. Sistemas para identificación mediante pruebas bioquímicas
Metodología de identificación
bioquímica
Kits/equipos
disponibles
Automatizado
Tiempo
que demora
Observación visual de turbidez o
cambio de pH, por utilización de
diversos sustratos
Paneles Api, Crystal,
baterías convencionales
no
15-24 hrs
Detección de cambios de pH por
utilización de Hidratos de carbono,
actividad enzimática, patrones de
resistencia
Tarjetas Vitek, Phoenix,
Microscan tradicionales,
Sensititre
sí
8-12 hrs
Detección fluorométrica o colorimétrica
de liberación de productos
cromogénicos por reacción de enzimas
preformadas
MicroScan Rapid panels,
BD Phoenix, Vitek, Trek
diagnostic Systems
sí
2-4 hrs
[Nuevas tecnologías en diagnóstico microbiológico... - Dra. Beatrice Hervé E.]