766
Tabla 2. Clasificación CDC para pacientes VIH
Categoría según CD4
Categorías clínicas
A
B
C
1
≥
500 cel/mm
3
A1 B1 C1*
2 200-499 cel/mm
3
A2 B2 C2*
3
<
200 cel/mm
3
A3* B3* C3*
*= SIDA
Adaptado de: CDC. 1993 Revised classification system for HIV infection
and expanded surveillance case definition for AIDS among adolescents
and adults. MMWR 1992; 41(no. RR-17).
Inmunofenotipo de poblaciones y subpoblaciones
linfocitarias por citometría de flujo
Para evaluar las inmunodeficiencias asociadas a un déficit de
la inmunidad celular es posible cuantificar las distintas pobla-
ciones de linfocitos, así como las subpoblaciones de linfocitos
T mediante el uso de la citometría de flujo.
La citometría de flujo es una técnica de análisis celular
multi-paramétrico en la que -mediante tamaño celular
y complejidad interna de la célula- es posible distinguir
distintos tipos celulares, por ejemplo, linfocitos, polimor-
fonucleares y monocitos. Además, mediante anticuerpos
marcados con fluorocromos dirigidos contra distintos
clúster de diferenciación (CD) de la superficie celular es
posible diferenciar distintas subpoblaciones linfocitarias,
siendo las más utilizadas en la evaluación de inmunode-
ficiencias los linfocitos B (CD19+), linfocitos T citotóxicos
(CD8+), linfocitos T Helper (CD4+) y linfocitos natural killer
(CD16+/CD56+) (5).
El estudio de las distintas poblaciones linfocitarias por cito-
metría de flujo, está recomendado para el estudio de inmuno-
deficiencias primarias combinadas severas en recién nacidos
y lactantes pequeños, evaluación de linfocitos T CD4+ en el
diagnóstico y seguimiento de pacientes VIH+, linfopenia T
CD4+ idiopática, entre otras (5).
Mención especial requiere la evaluación inmunológica en
personas viviendo con VIH, pues una de las características
más relevantes en la patogenia de la infección es la deple-
ción de los linfocitos T CD4+ durante el avance de la enfer-
medad y el aumento de los linfocitos T CD8+ en respuesta a
la infección viral.
La medición de subpoblaciones de linfocitos T Helper CD4+ y
Linfocitos T citotóxicos CD8+, permite al momento del diag-
nóstico clasificar al enfermo en tres estadios lo que tiene
relevancia clínica y pronóstica, pues a medida que dismi-
nuyen los Linfocitos T CD4+, aumenta el riesgo de infec-
ciones oportunistas, siendo el riesgo mayor con linfocitos
T CD4+ menores a 200 cel/ml. Por otra parte, se produce
un aumento en el número de linfocitos T citotóxicos CD8+,
lo que produce una inversión en el índice CD4+/CD8+, que
normalmente es 2 a 1. En el seguimiento también es rele-
vante las subpoblaciones linfocitarias T CD4+ y CD8+ pues
con la terapia antirretroviral altamente efectiva los linfo-
citos T CD4+ comienzan a subir y el número de linfocitos T
CD8+ tiende a normalizarse, esto se traduce en la restau-
ración del sistema inmunológico y en la disminución del
riesgo de infecciones (6). Tabla 2.
APROXIMACIÓN DE LABORATORIO EN EL ESTUDIO DE
ENFERMEDADES AUTOINMUNES
Las enfermedades autoinmunes constituyen un grupo hetero-
géneo de patologías, con manifestaciones clínicas diversas. En
este contexto el estudio de laboratorio constituye un comple-
mento importante después de haber realizado una completa
anamnesis y examen físico.
Anticuerpos anti núcleo-citoplasmáticos (ANA)
Son auto-anticuerpos dirigidos contra componentes nucleares:
dsDNA, histonas y ribonucleoproteínas. Son muy sensibles en
la pesquisa de patologías autoinmunes, pero poco específicos;
encontrándose positivos en distintas enfermedades e incluso,
en pacientes sanos (8, 9).
La técnica de elección para su estudio es la inmunofluo-
rescencia indirecta (IFI) en células HEP-2, observándose
distintos patrones de tinción fluorescente. Estos patrones
orientan a la estructura celular afectada y a distintas patolo-
gías autoinmunes. Del mismo modo, se efectúa una dilución
seriada de la muestra (titulación), con el fin de determinar de
forma indirecta la cantidad de auto-anticuerpo presente. El
informe del examen se realiza describiendo el título y patrón
de fluorescencia observado y su ubicación nuclear y/o cito-
plasmática (8). Tabla 3.
En población sana hasta un 33% de las personas puede resultar
con un ANA positivo a una dilución de 1/40, por tanto es consi-
derada la dilución de trabajo inicial. Sin embargo, estudios han
demostrado que una dilución
≥
1/160 se observa sólo en 5%
de la población sana, por lo tanto este título tiene mayor rele-
vancia clínica en el diagnóstico de una patología autoinmune
(9, 10).
[REV. MED. CLIN. CONDES - 2015; 26(6) 764-775]